ThermoFisher Scientific Invitrogen Countess II FL Manual Del Usaurio página 62

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Problema
Recuentos variables para la misma
muestra de células.
Recuentos variables al realizar
recuentos duplicados del mismo
portaobjetos.
Porcentaje de células muertas o células
vivas contadas como muertas
anormalmente alto.
Unidad USB no reconocida por el
instrumento.
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Posibles soluciones
Si está pipeteando distintas muestras de la misma muestra
de células, la variación puede deberse al pipeteo o a la
mezcla.
Utilice pipetas recién calibradas y asegúrese de que las
células estén bien suspendidas pipeteando arriba y abajo
varias veces antes de añadir azul de tripano.
Pipetee el preparado de esferas y azul de tripano arriba y
abajo varias veces para asegurarse de que está bien mezclado
y cargue de inmediato 10 µl en el portaobjetos.
Si está haciendo recuentos de duplicados de exactamente el
mismo portaobjetos, asegúrese mediante una inspección
visual de que se cuentan correctamente todas las células de
la imagen.
Puede haber una ligera diferencia en el campo de visión cada
vez que se inserta un portaobjetos. Dependiendo de la
concentración y uniformidad de las células, esto puede
causar cierta variabilidad cuando se realizan recuentos de
duplicados del mismo portaobjetos, aunque debería ser
menor del 10 %.
Cuando se cuentan menos células, un cambio de campo de
visón pequeño solo para un número pequeño de células
puede tener un efecto mayor. Cuente las células con una
concentración más alta para reducir la variabilidad.
Asegúrese de que no sacude ni agita el portaobjetos entre
recuentos.
Asegúrese de que las células están enfocadas correctamente,
de forma que las células vivas tengan el centro claro y las
células muertas sean totalmente oscuras (véase la página 59).
Si las células no están bien enfocadas y se ven oscuras en la
pantalla, el Countess
muertas.
Si las células están bien enfocadas, tienen el centro claro y se
cuentan como muertas, confirme que están dentro del rango
de tamaño de células adecuado y pruebe a ajustar la
configuración.
Si las células están expuestas a azul de tripano durante un
largo periodo de tiempo, puede verse afectada la viabilidad,
así que el portaobjetos debe prepararse y contarse de nuevo
cada vez para obtener mejores resultados.
Filtre los desechos utilizando los controles deslizantes de
tamaño, brillo y circularidad.
La unidad USB debe estar formateada en FAT32 para que el
instrumento la reconozca. Si no es así, vuelva a formatear la
unidad USB en FAT32 (página 52).
Inténtelo con otra unidad USB correctamente formateada.
Guía del usuario del contador de células automático Countess™ II FL
II FL las contará como células

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